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    1. 上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

      ELISA Kit for Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 (ENA78)

      CXCL5; SCYB5; Chemokine C-X-C-Motif Ligand 5; Small Inducible Cytokine Subfamily B(Cys-X-Cys),Member 5; Neutrophil-activating peptide ENA-78

      • 上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 產品包裝(模擬)
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      • 上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 實驗結果圖
      • SEA860Hu.jpg 標準曲線圖
      • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

      特異性

      本試劑盒用于檢測上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78),經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
      由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。

      回收率

      分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。

      樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
      serum(n=5) 98-105 102
      EDTA plasma(n=5) 85-94 91
      heparin plasma(n=5) 96-104 99

      精密度

      精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100
      批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
      批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
      批內差: CV<10%
      批間差: CV<12%

      線性

      在定值血清及血漿樣本內加入適量的上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)含量的測定值與理論值的比率。

      樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
      serum(n=5) 81-90% 92-99% 80-98% 79-99%
      EDTA plasma(n=5) 90-97% 81-94% 78-99% 80-96%
      heparin plasma(n=5) 81-92% 79-104% 81-94% 93-102%

      穩定性

      經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
      為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

      實驗流程

      1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
      2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
      3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
      4. 洗板3次;
      5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
      6. 洗板5次;
      7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
      8. 加終止液50µL,立即450nm讀數。

      實驗原理

      將上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。

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      參考文獻

      雜志 參考文獻
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      OncoTargets and Therapy The clinical significance of CXCL5 in non-small cell lung cancer. [pubmed:29200871]
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